In de rol van Destry, een vriendelijke hulpsheriff die niet van wapens houdt, moet Stewart de orde herstellen in het hopeloos corrupte grensstadje Bottleneck. Hoewel hij deze zware taak met tegenzin aanvaardt, moet hij al snel actie ondernemen nadat hij de verleidelijke Frency (Dietrich) heeft ontmoet, een bekoorlijk barmeisje dat onvergetelijke succesnummers zoals The Boys in the Back Room ten beste geeft en het hart van de hoofdrolspeler verovert.
Destry Rides Again, vol onvergetelijke vertolkingen, spitse dialogen, fantastische nummers en zeer populair bij de fans, bepaalde de norm voor alle western-komedies die nog zouden volgen. James Stewart en Marlen Dietrich schitteren in deze hilarische parodie op het western-genre.
